摘要：無(wú)菌實(shí)驗室設有無(wú)菌操作間、緩沖間和更衣間，無(wú)菌操作間潔凈度達到10000級，超凈臺潔凈度達到100級且室內溫度應保持在20~24℃，濕度保持在45%~60%[1]，此設置不僅滿(mǎn)足人體舒適度且又不利于室內微生物的生存

01.室內環(huán)境管理

無(wú)菌實(shí)驗室設有無(wú)菌操作間、緩沖間和更衣間，無(wú)菌操作間潔凈度達到10000級，超凈臺潔凈度達到100級且室內溫度應保持在20~24℃，濕度保持在45%~60%[1]，此設置不僅滿(mǎn)足人體舒適度且又不利于室內微生物的生存。初效、中效過(guò)濾器需要6個(gè)月更換1次，高效過(guò)濾器需要每年更換1次，以保證室內潔凈度達到標準。紫外燈應定期檢查更換，達到使用壽命會(huì )影響消毒滅菌的效果，同時(shí)應加強其他指標的監測，如潔凈度、細菌菌落數、靜壓差和風(fēng)量等。

02.物流管理

經(jīng)過(guò)γ射線(xiàn)滅菌的細胞培養瓶、培養皿、移液管、離心管等用1000mg/L濃度的消毒液徹底擦拭器材表面，消毒后放置于傳遞窗中，紫外燈照射30min后方可帶入實(shí)驗室。高壓消毒的器材如止血鉗、治療盤(pán)、離心套管等要用包布包裹2層，經(jīng)高壓蒸汽滅菌和烤箱烘干后使用。使用前應檢查物品包裹內外各種監測指示劑是否符合要求，再決定使用。貯存器材可放入無(wú)菌室的柜櫥內，若超過(guò)有效期應重新滅菌。進(jìn)包裝間要嚴格洗手，穿工作衣、戴口罩、帽子，包裝前檢查包布、治療巾，應清潔干燥無(wú)破損，做到一用一洗一消毒，各類(lèi)器材應光潔無(wú)銹、性能完好齊全。

外用3M化學(xué)指示膠帶封貼并注明品名、包裝者、查對者、滅菌期及有效使用期，各類(lèi)滅菌包包扎應松緊適度、整齊，減少各種污染的機會(huì )。所有實(shí)驗室器材需在最外層傳遞窗中用紫外燈照射30min后方可帶入緩沖間。滅菌包需在緩沖間內剝去最外層包布后方可帶入無(wú)菌操作間。在無(wú)菌操作間內剝去內層包布后擺放到固定位置備用。實(shí)驗室內各種器材要排放有序，定期檢查，補充基數。為保證潔凈度，應嚴禁堆放雜物，以防污染。污敷料及垃圾廢液等應分別放入專(zhuān)用廢液缸和污物桶中，待操作完畢后移出實(shí)驗室。徹底清潔室內物品及地面，減少污物在室內的停留時(shí)間。

對已污染或疑似污染培養基、細胞因子等應立即丟棄。實(shí)驗室設定了單獨的陽(yáng)性工作區域，包括陽(yáng)性無(wú)菌操作間、緩沖間和更衣間。陽(yáng)性工作區域與陰性工作區域完全隔離，防止肝炎病毒通過(guò)血液及相關(guān)物品等感染陰性患者回輸的細胞，防止患者通過(guò)細胞回輸感染乙肝病毒。工作人員進(jìn)入陽(yáng)性區域后，不得再進(jìn)入陰性區域，陽(yáng)性間每次使用的洗手衣需加入1000mg/L濃度消毒液，洗滌晾干以備下次使用，每次進(jìn)入陽(yáng)性間所著(zhù)一次性隔離衣在用后應棄于陽(yáng)性間垃圾袋中，陽(yáng)性液體污物應瓶裝密封后放入陽(yáng)性間醫療垃圾袋中。陽(yáng)性醫療垃圾袋從陽(yáng)性間的傳遞窗中傳出，放入專(zhuān)用醫療垃圾桶中，由院內專(zhuān)人負責回收。

03.運行制度管理

工作人員于每次實(shí)驗操作前30min打開(kāi)實(shí)驗室空氣凈化系統和紫外燈。如果實(shí)驗室長(cháng)期不用，需要在實(shí)驗前3h打開(kāi)空氣凈化系統，以提高空氣潔凈度。在潮濕季節使用時(shí)，打開(kāi)紫外燈時(shí)間需適當延長(cháng)，以加強消毒效果，保證實(shí)驗質(zhì)量。進(jìn)入無(wú)菌實(shí)驗室的人員要嚴格著(zhù)裝，穿著(zhù)經(jīng)嚴格高壓蒸汽滅菌過(guò)的洗手衣、隔離衣、口罩、帽子及用10g/L過(guò)氧乙酸溶液浸泡后晾干的拖鞋。著(zhù)裝程序如下：進(jìn)入第一更衣間后脫掉外衣?lián)Q一更拖鞋;隨即進(jìn)入第二更衣間，穿戴經(jīng)高壓蒸汽滅菌的一次性口罩帽子，著(zhù)洗手衣?lián)Q二更拖鞋，帶無(wú)菌橡膠手套;進(jìn)入第三更衣間后著(zhù)隔離服，換三更拖鞋，之后方可進(jìn)入無(wú)菌操作間操作。

保持實(shí)驗室相對密閉狀態(tài)，嚴格控制人員進(jìn)出，必要情況下需要工作人員互相溝通協(xié)調時(shí)，可通過(guò)房間對講電話(huà)聯(lián)絡(luò )，將工作人員出入次數降到最低，減少不必要的渦流形成，使室內的氣壓始終處于正壓狀態(tài)。各項操作要集中，操作過(guò)程要輕穩，不能在實(shí)驗室抖動(dòng)衣物布類(lèi)，以防止微粒在室間飛揚，保證室間空氣的潔凈。實(shí)驗室人員進(jìn)入無(wú)菌操作間應衣帽整潔、修剪指甲，嚴格執行無(wú)菌技術(shù)操作。一切操作必須在百級凈化的超凈工作臺內進(jìn)行，超凈工作臺在使用前需打開(kāi)其紫外燈輻照滅菌30min以上，并同時(shí)打開(kāi)超凈工作臺進(jìn)行吹風(fēng)。實(shí)驗中應保持無(wú)菌操作，拿取物品不要跨過(guò)無(wú)菌面；培養瓶不要過(guò)早打開(kāi)，對于已開(kāi)瓶口者要盡量避免垂直放置;吸管等不能觸及瓶口，以防細菌污染或細胞的交叉感染。每次操作過(guò)程中留取定量樣品進(jìn)行細菌、真菌、支原體檢測，以檢查無(wú)菌操作的可靠性及細胞是否污染。操作完畢后應及時(shí)清理無(wú)菌實(shí)驗室。組織實(shí)驗室全體人員進(jìn)行理論學(xué)習，明確無(wú)菌實(shí)驗室工作原理、環(huán)境要求，設置嚴格的工作流程，明確分工并強化責任技師有效的合作配合意識。

04.衛生清潔管理

清潔工作應在實(shí)驗室空氣凈化系統運行中進(jìn)行，清潔工具采用不掉纖維的織物材料制作。一切清潔工作必須采用濕式打掃，每周進(jìn)行1次徹底清潔。需用1000mg/L含氯消毒液擦拭房間桌、椅、墻壁、天花板以及轉凳、顯微鏡等固定在實(shí)驗室內的物體。用體積分數為75%的酒精擦拭培養箱、超凈臺和紫外線(xiàn)燈管。地板很容易藏塵(如人體皮膚、毛發(fā)的脫落、布類(lèi)的纖維等)、藏菌等，是室內的污染源，應在吸塵器吸除后用1000mg/L含氯消毒液擦拭。抽風(fēng)、回風(fēng)口也易藏塵、藏菌，應重點(diǎn)拆洗清潔，以確保塵埃過(guò)濾效果。衛生清潔時(shí)應用10g/L過(guò)氧乙酸溶液浸泡消毒工作人員所穿的拖鞋，待晾干后再使用。每周進(jìn)行徹底清潔時(shí)應將實(shí)驗室內物品如移液器、移液器槍頭、止血鉗、治療盤(pán)(蕁蕁上接第76頁(yè)蕁蕁)以及離心機套管等進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。清潔工作完成后，手術(shù)室凈化系統繼續運行時(shí)間一般不應少于30min。